Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. adalah salah satu produsen dan pemasok z-arg-leu-arg-gly-gly-amc cas 167698-69-3 yang paling berpengalaman di Tiongkok. Selamat datang di grosir z-arg-leu-arg-gly-gly-amc cas 167698-69-3 dalam jumlah besar untuk dijual di sini dari pabrik kami. Pelayanan yang baik dan harga yang wajar tersedia.
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMC, rumus molekul C40H56N12O9, CAS 167698-69-3. Sebagai peptida, Sebagai peptida, ia harus memiliki sifat umum zat peptida. Peptida merupakan senyawa yang dibentuk dengan menghubungkan asam amino melalui ikatan peptida dan memiliki kelarutan yang baik dalam air karena gugus polar pada rantai peptida (seperti gugus amino dan karboksil) dapat membentuk ikatan hidrogen dengan molekul air.
Selain itu, zat peptida biasanya memiliki aktivitas biologis yang tinggi dan dapat berpartisipasi dalam berbagai proses biologis. Ia memiliki beragam aplikasi dalam biokimia dan penelitian medis, termasuk berfungsi sebagai substrat peptida untuk SARS-CoV PLpro, probe fluoresen, alat skrining inhibitor throughput tinggi, reagen penelitian interaksi protein, dan reagen imunologi. Aplikasi ini tidak hanya membantu mengungkap esensi dan mekanisme proses biologis, namun juga memberikan ide dan metode baru untuk pengembangan obat dan pengobatan penyakit.
|
Tutup dan Gabus Botol yang Disesuaikan:
|
|
|
Rumus Kimia |
C32H51N11O9 |
|
Massa Tepat |
733 |
|
Berat Molekul |
734 |
|
m/z |
733 (100.0%), 734 (34.6%), 735 (3.1%), 735 (2.7%), 734 (2.2%), 735 (1.8%), 734 (1.8%), 735 (1.4%) |
|
Analisis Unsur |
C, 52.38; H, 7.01; N, 21.00; O, 19.62 |
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMC, sebagai zat peptida spesifik, memiliki beragam aplikasi dalam biokimia dan penelitian medis.
Pertama
Ini sering digunakan sebagai substrat peptida untuk SARS-CoV PLpro (Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Pepaya like Protease). SARS-CoV adalah virus corona, dan PLpro-nya adalah enzim kunci dalam proses replikasi virus, berpartisipasi dalam pemrosesan protein polimer virus. Oleh karena itu, penelitian ini memiliki nilai penerapan yang penting dalam mempelajari mekanisme replikasi SARS-CoV, skrining obat antivirus, dan pengembangan vaksin.
Kedua
Ini juga dapat berfungsi sebagai probe fluoresen untuk pencitraan biologis dan penelitian lokalisasi sel. Karena adanya gugus AMC (amino metil kumarin), peptida ini menunjukkan sifat fluoresensi dan dapat memancarkan fluoresensi saat eksitasi. Hal ini memungkinkan pelabelan molekul atau struktur tertentu dalam sel dan jaringan, sehingga mengungkapkan perubahan dinamis dari proses biologis.
Selain itu
Ini juga dapat digunakan untuk penyaringan{0}inhibitor throughput tinggi dan analisis berkelanjutan. Dalam proses pengembangan obat, penting untuk menemukan senyawa yang secara efektif dapat menghambat aktivitas enzim atau protein tertentu. Sebagai substrat peptida untuk PLpro, dapat digunakan bersama dengan inhibitor potensial untuk mengevaluasi aktivitasnya dengan mengukur perubahan laju hidrolisis substrat. Metode ini memiliki keunggulan throughput yang tinggi, sensitivitas yang tinggi, dan spesifisitas yang tinggi, yang dapat mempercepat proses skrining obat.
Akhirnya
Selain itu dapat juga diterapkan pada penelitian imunologi. Zat peptida berperan penting dalam sistem imun dan dapat berperan serta dalam respon imun sebagai antigen atau antibodi. Urutan dan struktur spesifik Z-ARG-LEU-ARG-GLY-AMC dapat memberikan imunogenisitas atau imunoreaktivitas, sehingga cocok untuk pembuatan antibodi, vaksin, atau reagen imunodiagnostik.
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMCadalah peptida bioaktif yang biasa digunakan dalam penelitian biomedis dan pengembangan obat. Berikut adalah langkah-langkah rinci dan persamaan kimia yang sesuai dari metode laboratorium untuk mensintesis Z-ARG-LEU-ARG-GLY-AMC:
Langkah 1
Pilih operator yang sesuai:
Gunakan bahan pembawa yang sesuai (seperti resin Rink Amide MBHA) untuk memasang grup AMC akhir pada bahan pembawa.
Langkah 2
Sintesis berurutan rantai polipeptida:
Dengan menggunakan strategi sintesis fase padat Fmoc, residu Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY ditambahkan secara berurutan ke ujung tetap grup AMC pada pembawa. Penambahan setiap residu meliputi langkah-langkah berikut:
-Deproteksi: Hapus gugus pelindung Fmoc dan paparkan gugus amino bebas dari asam amino.
-Kopling: Pembentukan ikatan peptida baru antara ester asam amino teraktivasi dan gugus amino bebas pada pembawa.
Langkah 3
Hapus dasar pelindung:
Setelah sintesis rantai polipeptida selesai, hilangkan gugus pelindung Fmoc di ujung N-dan paparkan gugus amino bebas di ujungnya.
Langkah 4
Hapus rantai polipeptida:
Lepaskan rantai polipeptida dari pembawa dan secara bersamaan lepaskan semua kelompok pelindung rantai samping.
Langkah 5
Aminoasilasi:
Larutkan peptida yang disintesis dalam pelarut yang sesuai, seperti DMF, dan tambahkan formamida (HONHCOCH3) dalam jumlah yang sesuai untuk reaksi karbamoilasi. Langkah ini akan memperkenalkan gugus pelindung Z-pada rantai samping setiap residu arginin.
Langkah 6
Penghapusan basis pelindung Z:
Gunakan reagen pelindung yang sesuai, seperti TFA (asam trifluoroasetat), untuk menghilangkan gugus pelindung Z-dari residu arginin dan mengekspos radikal bebas pada rantai sampingnya.
Langkah 7
Aminometilasi:
Larutkan peptida dengan gugus pelindung Z yang dihilangkan dalam pelarut yang sesuai, tambahkan metanol amina (MeNH2) dalam jumlah yang sesuai, dan lakukan reaksi metilasi amino. Langkah ini akan memperkenalkan metilasi pada rantai samping setiap residu arginin.
Langkah 8
Pemurnian produk mentah:
Dengan menggunakan teknik kromatografi yang sesuai seperti kromatografi cair kinerja tinggi fase terbalik, peptida yang disintesis dimurnikan dari produk mentah untuk menghilangkan kotoran dan zat yang tidak bereaksi.
Langkah 9
Pemurnian:
Pemurnian lebih lanjut dari produk mentah dilakukan menggunakan teknik kromatografi tingkat tinggi seperti kromatografi cair kinerja tinggi fase terbalik atau kromatografi kolom untuk mendapatkan produk target dengan kemurnian lebih tinggi.
Langkah 10
Identifikasi:
Gunakan teknik spektrometri massa (seperti analisis spektrometri massa) dan teknik kromatografi (seperti kromatografi cair kinerja tinggi) untuk mengidentifikasi struktur dan kemurnian peptida yang dimurnikan.
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMC adalah "standar emas" untuk deteksi protease
Di bidang penelitian biokimia dan biologi molekuler, deteksi aktivitas protease merupakan langkah inti dalam menguraikan sinyal sel, mekanisme penyakit, dan pengembangan obat. Metode deteksi tradisional, seperti metode kolorimetri dan radiolabel, sulit memenuhi kebutuhan penelitian modern karena sensitivitasnya yang rendah, pengoperasian yang rumit, atau potensi bahaya keselamatan.Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMC(disingkat Z-LRGG-AMC), sebagai substrat peptida berlabel fluoresen, telah menjadi "standar emas" untuk deteksi protease karena sensitivitas, spesifisitas, dan kemampuan pemantauan-waktunya yang tinggi.
Mekanisme aksi: konversi sinyal fluoresen yang tepat
Proses tindakan Z-LRGG-AMC dapat dibagi menjadi tiga langkah:
Protease, seperti papain SARS-CoV seperti protease PLpro, secara spesifik berikatan dengan rangkaian peptida substrat melalui triad katalitik (Cys His Asp) di pusat aktif. Misalnya, PLpro memprioritaskan pengenalan rangkaian Arg-X-Arg-Gly, dengan X adalah asam amino hidrofobik (seperti Leu).
Protease mengkatalisis hidrolisis ikatan peptida antara Arg Leu, melepaskan gugus fluoresen AMC. Kinetika reaksi pemotongan sesuai dengan persamaan Mie, dan intensitas fluoresensi meningkat secara linier seiring waktu, dengan kemiringan yang mencerminkan aktivitas enzim.
Pemantauan intensitas emisi fluoresensi 460nm secara real-time menggunakan spektrofotometer fluoresensi atau pembaca pelat mikro. Misalnya, dalam penelitian SARS CoV, aktivitas PLpro dapat dianalisis secara kuantitatif dengan mendeteksi sinyal fluoresensi yang dihasilkan oleh pembelahan Z-LRGG-AMC, dengan sensitivitas pada tingkat molar Dana.
Skenario aplikasi: Alat ilmiah multi domain
Penelitian tentang protease virus: alat inti untuk pengembangan obat anti virus corona
PLpro bertanggung jawab atas pemrosesan poliprotein virus dan pelepasan kekebalan tubuh inang, dan merupakan target utama obat antivirus. Z-LRGG-AMC, sebagai substrat spesifik PLpro, memiliki efisiensi pembelahan lebih dari tiga kali lebih tinggi dibandingkan substrat tradisional seperti Z-Gly-Gly Arg AMC. Dalam skrining obat, obat antivirus potensial dapat diidentifikasi secara cepat dengan mendeteksi laju penghambatan senyawa pada pembelahan PLpro Z-LRGG-AMC.
For example, a study used this substrate to screen candidate molecules with inhibition rate>90% dari perpustakaan yang berisi 100.000 senyawa, memberikan dukungan penting bagi pengembangan obat antivirus seperti remdesivir. Dengan membandingkan efisiensi pemotongan berbagai strain virus PLpro pada Z-LRGG-AMC, pengaruh variasi virus terhadap aktivitas protease dapat diketahui. Misalnya, tingkat penurunan SARS-CoV-2 PLpro di Z-LRGG-AMC adalah 1,5 kali lebih cepat dibandingkan SARS-CoV PLpro, sehingga menunjukkan bahwa virus ini mungkin memiliki kemampuan regulasi imun inang yang lebih kuat.
Penelitian tentang Ubiquitinase: Penyelidikan Regulasi Degradasi Protein
IPaseT dan DUB lainnya mengatur degradasi protein dengan memotong urutan terminal C-ubiquitin. Z-LRGG-AMC mensimulasikan struktur terminal C-ubiquitin, dengan nilai kcat/Km 18 M ⁻¹ s ⁻¹, menjadikannya substrat yang ideal untuk mempelajari kinetika DUB. Misalnya, dalam penelitian kanker, hubungan antara ketidakseimbangan homeostasis protein dan perkembangan tumor dapat dievaluasi dengan mendeteksi aktivitas pembelahan DUB pada Z-LRGG-AMC dalam sel tumor.
Dikombinasikan dengan teknologi transfer energi resonansi fluoresensi (FRET), Z-LRGG-AMC dapat digunakan untuk pelacakan-waktu nyata dari proses modifikasi ubiquitinasi intraseluler. Misalnya, dalam model penyakit neurodegeneratif, mendeteksi tingkat ubiquitinasi alpha synuclein mengungkapkan hubungan antara agregasi dan disfungsi proteasome.
Skrining obat dengan throughput tinggi: mempercepat pengembangan obat baru
Dalam pelat sumur 384, Z-LRGG-AMC dicampur dengan senyawa uji dan inhibitor enzim disaring dengan cepat berdasarkan perubahan sinyal fluoresensi. Metode ini mempunyai throughput yang tinggi (dapat menyaring ribuan senyawa per hari) dan biaya rendah (biaya pori tunggal<0.1 USD), and has become a standard process for drug development. By changing the substrate concentration, the Km (Michaelis constant) and Vmax (maximum reaction rate) of the enzyme on Z-LRGG-AMC were determined, providing a theoretical basis for inhibitor design. For example, a study used this substrate to determine a Km value of 12 μ M for PLpro, providing key data for optimizing inhibitor affinity.
Pertanyaan yang Sering Diajukan
Apakah larut seluruhnya dalam DMSO atau tampak larut? --Penipuan yang tidak terlihat dengan mata telanjang
+
-
Ini adalah "ahli penyamaran" dalam DMSO - jernih saat pertama kali dilarutkan, namun di bawah induksi sejumlah kecil air, ia secara perlahan mengendapkan endapan skala nano yang sama sekali tidak dapat dikenali oleh mata telanjang. Meskipun data kelarutan menyatakan 'larut dalam DMSO', substrat peptida sangat rentan terhadap sejumlah sisa air dalam DMSO. Pengetahuan sebenarnya adalah bahwa pelarut yang paling cocok bukanlah DMSO, tetapi larutan asam asetat 10%. Informasi penting ini jarang muncul di halaman produk biasa, dan merupakan "trik" untuk memecahkan masalah "reproduksibilitas hasil yang buruk" dan "penyimpangan sinyal".
Bukan takut cahaya, tapi kerusakan fisik saat "pembekuan"? --"Sensasi nyeri" khusus dari grup AMC
+
-
Pembekuan dan pencairan berulang kali setara dengan "penyiksaan fisik" baginya, meskipun tidak terdegradasi, molekul yang terkumpul akan kehilangan aktivitas substrat. Meskipun gugus AMC sendiri tahan terhadap cahaya, peptida ini sangat rentan terhadap agregasi ireversibel akibat kompresi kristal es selama siklus pembekuan-pencairan berulang. Rekomendasi standar industri: Larutan dapat disimpan selama 6 bulan pada suhu -80 derajat C, dan hanya selama 1 bulan pada suhu -20 derajat C. Setelah dicairkan, sisa cairan induk harus segera dikemas atau dibuang. Hilangnya sinyal secara tiba-tiba yang Anda temui kemungkinan besar disebabkan oleh fenomena "kematian palsu" yang disebabkan oleh siklus pembekuan-pencairan.
Siapakah "anak kandung" Z-Leu-Arg Gly Gly AMC?
+
-
Z-LRGG-AMC (tetrapeptida) adalah "substrat universal" untuk ubiquitinase, sedangkan Z-RLRGG-AMC (pentapeptida) adalah "kunci khusus" untuk heteropeptidase T dan virus SARS PLpro.
Meskipun keduanya umumnya disebut sebagai "substrat enzim ubiquitin", keduanya sangat dapat dibedakan:
Z-LRGG-AMC: menyimulasikan terminal C-ubiquitin dan terutama digunakan untuk deteksi universal keluarga UCH (seperti UCH-L3).
Z-RLRGG-AMC: Arg tambahan telah ditambahkan, menjadikannya substrat pilihan khusus untuk deubiquitinase USP5 dan SARS coronavirus PLpro.
Mengapa DTT (dithiothreitol) harus ditambahkan ke buffer reaksi? --'Simbol kimia penyelamat hidup' dari sistein aktif
+
-
Jika zat pereduksi (seperti DTT) dalam jumlah yang cukup tidak ditambahkan, lokasi pembelahannya akan "berkarat" dalam beberapa menit, mengubah substrat menjadi "materi mati".
Hidrolisisnya bergantung pada sistein bebas (Cys) di pusat aktif enzim. Gugus tiol mudah teroksidasi oleh udara membentuk ikatan disulfida (- S-S -), menyebabkan inaktivasi enzim. Sistem reaksi standar (seperti buffer HEPES, pH 7,4) harus mengandung 1-5 mM DTT. 'Aturan tidak tertulis' ini sering kali hanya disebutkan dalam anotasi karakter kecil atau detail metodologis, dan merupakan penyebab paling umum yang menyebabkan enzim percobaan pemula menjadi tidak aktif tidak peduli berapa banyak enzim yang ditambahkan'.
Tag populer: z-arg-leu-arg-gly-gly-amc cas 167698-69-3, pemasok, produsen, pabrik, grosir, beli, harga, massal, untuk dijual