Fluoresensi diasetat(FDA), dengan rumus molekul C24H16O7, nomor CAS 596-09-8, berat molekul 416.380, biasanya berbentuk bubuk kuning muda dengan kristalinitas yang baik. Kelarutan dalam aseton relatif tinggi, mencapai 25mg/mL. Namun informasi mengenai kelarutannya dalam pelarut lain masih terbatas, namun secara umum diyakini bahwa kelarutannya dipengaruhi oleh polaritas pelarut dan suhu. Merupakan senyawa lipofilik yang dapat menembus membran sel pada sel hidup dan dihidrolisis sebagai substrat esterase untuk menghasilkan fluorescein fluoresen. Karakteristik ini membuatnya dapat diterapkan secara luas di berbagai bidang seperti deteksi viabilitas sel, deteksi mikroba, dan evaluasi aktivitas enzim. Ia sendiri tidak memancarkan cahaya, tetapi fluorescein yang dihasilkan oleh hidrolisis sel hidup dapat memancarkan fluoresensi hijau. Panjang gelombang eksitasi dan emisinya masing-masing adalah 488 nm dan 530 nm, menjadikannya probe fluoresen yang umum digunakan dalam sitometri aliran dan instrumen deteksi biologis lainnya.
|
|
|
|
Rumus Kimia |
C24H16O7 |
|
Massa Tepat |
416 |
|
Berat Molekul |
416 |
|
m/z |
416 (100.0%), 417 (26.0%), 418 (2.7%), 418 (1.4%) |
|
Analisis Unsur |
C, 69.23; H, 3.87; O, 26.90 |
Fluoresensi Diasetat(FDA) adalah bahan kimia yang banyak digunakan dalam bidang biologi, kedokteran, pemantauan lingkungan, dan bidang industri.
Biologi Dan Penelitian Medis
1. Viabilitas sel dan deteksi aktivitas
(1) Analisis aliran sitometri: Sebagai substrat esterase, ia dapat memasuki sel hidup melalui membran sel dan dihidrolisis menjadi fluorescein oleh esterase di dalam sel, memancarkan fluoresensi hijau. Oleh karena itu, sering digunakan dalam flow cytometry untuk mendeteksi viabilitas sel dan mengevaluasi status kelangsungan hidup sel dengan mengukur intensitas fluoresensi.
(2) Penilaian sitotoksisitas: Dalam studi sitotoksisitas, penilaian ini dapat digunakan untuk mengevaluasi efek obat-obatan, bahan kimia, dll. terhadap aktivitas sel. Dengan membandingkan perubahan intensitas fluoresensi sel sebelum dan sesudah perlakuan, dapat diketahui apakah zat tersebut mempunyai efek toksik pada sel.
2. Deteksi dan identifikasi mikroba
(1) Deteksi aktivitas mikroba: dapat digunakan untuk mendeteksi aktivitas mikroba di lingkungan, seperti aktivitas mikroba total di dalam tanah. Dengan mengukur intensitas fluoresensi yang dihasilkan oleh hidrolisis FDA oleh mikroorganisme, tingkat aktivitas mikroorganisme dapat dievaluasi.
(2) Deteksi bakteri dan virus: Dalam penelitian biologi dan medis, juga dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan bakteri dan virus. Melalui teknik pewarnaan atau pelabelan tertentu, identifikasi dan penghitungan bakteri dan virus secara cepat dapat dilakukan.
3. Deteksi biomarker dan aktivitas enzim
(1) Evaluasi aktivitas enzim: dapat digunakan sebagai substrat berbagai enzim untuk mengevaluasi aktivitasnya. Misalnya, ia dapat berfungsi sebagai substrat fluoresen untuk glutathione S-transferase Pi (hGTP1-1) manusia, dan aktivitasnya dapat dievaluasi dengan mengukur intensitas fluoresensi.
(2) Deteksi biomarker: Dalam diagnosis penyakit, dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan dan tingkat biomarker tertentu, seperti penanda sel kanker. Diagnosis dini dan pemantauan pengobatan penyakit dapat dicapai melalui metode deteksi spesifik.
Pemantauan Lingkungan
1. Pemantauan kualitas air
(1) Mendeteksi mikroorganisme di dalam air: dapat digunakan untuk mendeteksi mikroorganisme di dalam air, seperti kista Giardia hidup. Dengan mengukur intensitas fluoresensi yang dihasilkan oleh hidrolisis FDA oleh mikroorganisme dalam sampel air, kontaminasi mikroba terhadap kualitas air dapat dievaluasi.
(2) Penilaian vitalitas alga: Dalam pemantauan lingkungan, penilaian ini juga dapat digunakan untuk mengevaluasi status vitalitas alga di badan air.
Dengan mengukur kemampuan penyerapan dan konversi sel alga terhadap FDA, status pertumbuhan dan kualitas lingkungan ekologi alga dapat ditentukan.
2. Pemantauan tanah
Aktivitas mikroba tanah: Seperti disebutkan sebelumnya, aktivitas mikroba tanah dapat digunakan untuk mengukur aktivitas mikroba total dalam tanah. Hal ini sangat penting untuk menilai status kesehatan dan tingkat kesuburan ekosistem tanah.
Aplikasi Industri
1. Peralatan LED
Bahan fluoresen: Dapat digunakan sebagai bahan fluoresen pada perangkat LED untuk mengubah dan menyesuaikan warna cahaya dengan menyerap cahaya yang dipancarkan oleh LED dan memancarkan warna fluoresensi yang berbeda.
2. Penandaan minyak
Agen pelabelan fluoresen: Dalam industri perminyakan, dapat digunakan sebagai agen pelabelan fluoresen. Dengan menambahkannya ke produk minyak bumi untuk memberinya sifat berpendar, hal ini memfasilitasi identifikasi dan lokalisasi dalam proses deteksi, pelacakan, dan pemulihan kebocoran.
Aplikasi Lainnya
1. Penginderaan suhu dalam penelitian medis
Pemeriksaan sensitif suhu: Sifat fluoresensi sensitif terhadap suhu, oleh karena itu dapat digunakan sebagai pemeriksaan sensitif suhu dalam penelitian medis. Dengan mengukur perubahan intensitas fluoresensi,-pemantauan perubahan suhu secara real-time di lingkungan in vivo atau in vitro dapat dilakukan.
2. Pengobatan penyakit iskemik
Mengobati iskemia: Penelitian menunjukkan bahwa obat ini dapat digunakan untuk mengobati penyakit iskemik dalam situasi tertentu. Melalui mekanisme biokimia spesifiknya, dapat mendorong pemulihan dan perbaikan jaringan iskemik.
Sintesis darifluorescein diasetat(FDA) adalah proses kimia yang kompleks namun penting, dan produknya memiliki aplikasi luas dalam biologi, kedokteran, pemantauan lingkungan, dan bidang lainnya.
Sintesis FDA biasanya didasarkan pada fluorescein atau senyawa prekursornya, yang memasukkan gugus asam asetat melalui reaksi esterifikasi. Reaksi esterifikasi adalah reaksi sintesis organik yang umum digunakan, yang biasanya melibatkan reaksi asam karboksilat dan alkohol dengan adanya katalis asam untuk menghasilkan ester. Dalam sintesis, fluorescein atau prekursornya (seperti diacetylfluorescein) bereaksi dengan asetat anhidrida untuk menghasilkan zat tersebut.
1. Persiapan bahan baku
Fluoresensi:
Sebagai bahan awal, fluorescein dapat disintesis atau dibeli melalui berbagai metode.
Anhidrida asetat:
Sebagai zat pengasilasi dalam reaksi esterifikasi, kemurnian dan stabilitas perlu dipastikan.
Katalis:
Seperti piridin dan asam sulfat, digunakan untuk mendorong reaksi esterifikasi.
Pelarut:
Seperti etanol anhidrat, DMSO, dll., digunakan untuk melarutkan reaktan dan produk, mendorong kemajuan reaksi yang seragam.
2. Reaksi esterifikasi
(1) Kondisi reaksi:
Biasanya dilakukan pada suhu tertentu (misalnya 90-120 derajat C) dan tekanan untuk memastikan pencampuran dan reaksi reaktan secara menyeluruh.
(2) Langkah-langkah operasi:
Larutkan fluorescein dalam pelarut dalam jumlah yang sesuai, tambahkan asetat anhidrida dan katalis, aduk rata, lalu panaskan dan refluks selama jangka waktu tertentu (misalnya beberapa jam). Pemantauan terus menerus terhadap kemajuan reaksi diperlukan selama proses reaksi untuk memastikan reaksi selesai.
(3) Pasca pemrosesan:
Setelah reaksi selesai, produk kasar diperoleh melalui tahapan seperti penyaringan, pencucian, dan pengeringan. Kemudian dilakukan pemurnian menggunakan metode seperti rekristalisasi dan kromatografi kolom untuk mendapatkan-kemurnian tinggi FDA.
3. Contoh sintesis spesifik
(1) Persiapan fluorescein:
Pertama, fluorescein dibuat melalui serangkaian reaksi kimia. Proses ini dapat mencakup langkah-langkah seperti peleburan, penambahan seng klorida, reaksi, pemadatan, pendinginan, perlakuan asam, pencucian, pengeringan, dll.
(2) Reaksi esterifikasi:
Ambil fluorescein dalam jumlah tertentu (misalnya 6,3 g, sekitar 0,02 mol), tambahkan anhidrida asetat dalam jumlah yang sesuai (misalnya 16 ml, sekitar 5 kali jumlah teoritis) dan katalis (seperti piridin), panaskan hingga suhu tertentu (misalnya 90 derajat C) dalam penangas minyak, aduk dan aduk rata. Kemudian secara bertahap naikkan suhu ke suhu yang lebih tinggi (misalnya 120 derajat C) dan bereaksi selama jangka waktu tertentu (misalnya 7 jam).
(3) Pasca pemrosesan:
Setelah reaksi selesai, dinginkan secara alami hingga suhu kamar dan saring untuk mendapatkan produk kasar. Cuci dan keringkan produk mentah untuk mendapatkan produk jadi.
Pengoperasian yang aman:
Selama proses sintesis, bahan kimia beracun dan berbahaya seperti asetat anhidrida dan piridin terlibat. Penting untuk mengoperasikannya di lemari asam dan memakai peralatan pelindung yang sesuai (seperti kacamata pelindung, jas lab, sarung tangan, dll.).
Kontrol kondisi reaksi:
Reaksi esterifikasi sensitif terhadap suhu, tekanan, waktu reaksi dan kondisi lainnya, dan kontrol yang ketat diperlukan untuk memastikan kelancaran reaksi dan kualitas produk.
Langkah-langkah pemurnian:
Langkah-langkah pemurnian selama pasca-pemrosesan sangat penting untuk mendapatkan produk-kemurnian tinggi. Penting untuk memilih metode pemurnian yang sesuai dengan situasi aktual dan melakukan perawatan pencucian dan pengeringan yang memadai.
Untuk meningkatkan efisiensi sintesis dan kemurnian produk, metode sintesis dapat dioptimalkan. Misalnya:
(1) Meningkatkan katalis:
Pemilihan katalis yang tepat dapat meningkatkan laju dan hasil reaksi esterifikasi.
(2) Mengoptimalkan kondisi reaksi:
Dengan menyesuaikan suhu reaksi, tekanan, waktu, dan kondisi lainnya, kemurnian dan hasil produk dapat lebih ditingkatkan.
(3) Meningkatkan metode pemurnian:
Mengadopsi metode pemurnian yang lebih efisien (seperti pemisahan kromatografi, pemisahan membran, dll.) dapat meningkatkan kemurnian dan tingkat perolehan kembaliFluoresensi Diasetat.
Apa efek samping dari zat ini?
Pengujian viabilitas sel:
FDA banyak digunakan untuk pengujian viabilitas sel karena dapat memasuki sel hidup dan dipecah di dalam sel untuk menghasilkan fluoresensi, sehingga memungkinkan penilaian visual terhadap status viabilitas sel.
Toksisitas rendah:
Pada konsentrasi penggunaan normal, FDA memiliki toksisitas yang rendah terhadap sel dan biasanya tidak menimbulkan efek negatif yang signifikan terhadap sel.
Kerusakan sel:
Jika konsentrasi FDA terlalu tinggi atau waktu pemrosesan terlalu lama, dapat menyebabkan kerusakan sel tertentu. Hal ini mungkin disebabkan oleh dampak FDA atau produk penguraiannya terhadap permeabilitas membran sel atau metabolisme internal sel.
Reaksi alergi:
Bagi individu tertentu, FDA dapat menyebabkan reaksi alergi. Reaksi ini biasanya berhubungan dengan konstitusi dan status sistem kekebalan tubuh seseorang, namun kemungkinan terjadinya relatif rendah.
Pencemaran lingkungan:
FDA perlu menanganinya dengan baik setelah digunakan untuk menghindari potensi pencemaran terhadap lingkungan dan ekosistem.
Meskipun FDA sendiri bukanlah bahan kimia yang sangat berbahaya, penanganan yang tidak tepat terhadap bahan kimia apa pun dapat berdampak negatif terhadap lingkungan.
Kontrol konsentrasi:
Saat menggunakan FDA untuk pengujian viabilitas sel, konsentrasi dan waktu pemrosesan harus dikontrol dengan ketat untuk menghindari kerusakan sel yang tidak perlu.
Perlindungan pribadi:
Operator harus mengenakan alat pelindung diri yang sesuai seperti sarung tangan, masker, dan kacamata saat menggunakan FDA untuk mencegah kontak langsung dengan kulit, mata, atau saluran pernapasan.
Pembuangan limbah:
Setelah digunakan, larutan FDA harus dibuang dengan benar sesuai dengan peraturan terkait untuk memastikan bahwa larutan tersebut tidak menyebabkan pencemaran terhadap lingkungan.
Pertanyaan Umum
Apa itu fluorescein diasetat?
Fluorescein diasetat (FDA) didefinisikan sebagaiester asam lemak yang menjadi fluoresen setelah hidrolisis enzimatik oleh asetiltransferase dalam sel mikobakteri hidup, memungkinkan identifikasi basil yang layak dalam uji viabilitas.
Untuk apa fluorescein digunakan?
Injeksi fluorescein digunakanuntuk membantu bagian mata tertentu (misalnya retina, iris) menjadi lebih terlihat selama prosedur medis mata. Obat ini hanya boleh diberikan oleh atau di bawah pengawasan langsung dari dokter Anda. Produk ini tersedia dalam bentuk sediaan berikut: Larutan.
Apa analisis fluorescein diasetat?
Fluorescein diasetat (FDA) adalahdigunakan untuk menentukan aktivitas mikroba. Penentuan aktivitas ini dapat dilakukan dalam kerangka berbagai objek penelitian dengan menggunakan tanah, serasah, gambut, dll. Metode ini didasarkan pada reaksi hidrolisis konversi fluorescein diacetate (FDA) menjadi fluorescein.
Tag populer: fluorescein diacetate cas 596-09-8, pemasok, produsen, pabrik, grosir, beli, harga, massal, untuk dijual