bubuk agarosaadalah zat organik dengan rumus kimia c24h38o19. Ini adalah manik putih atau kuning seperti partikel gel atau bubuk, yang merupakan polimer linier, dan struktur dasarnya adalah 1,3 terikat - D-galaktosa dan 1,4-terkait 3,6-endoeter-l-galaktosa dihubungkan secara bergantian.
Agar pektin adalah campuran heterogen yang terdiri dari banyak molekul yang lebih kecil. Agarosa umumnya dipanaskan hingga di atas 90 derajat untuk larut dalam air, dan ketika suhu turun hingga 35-40 derajat, ia membentuk gel semi-padat yang baik, yang merupakan ciri utama dan dasar dari berbagai kegunaannya. Kinerja gel agarosa biasanya dinyatakan dengan kekuatan gel. Semakin tinggi kekuatannya, semakin baik kinerja gelnya.
Bubuk Agarosa, disingkat Ag, adalah komponen agar netral yang tidak bermuatan, juga diterjemahkan sebagai agarosa atau agarosa. Struktur kimia agarosa dihubungkan oleh 1,3 - D-galaktosa dan 1,4-terkait 3,6-endoeter-l-galaktosa dihubungkan secara bergantian.
Agarosa berasal dari polisakarida alga merah, dan komponen utamanya adalah poligalaktosa, dimana sekitar 70% adalah agarosa dan 30% adalah agarosa rantai bercabang. Agarosa memiliki struktur linier dan dilewatkan oleh D-galaktosa dan 3,6-galaktosa dehidrasi - 1, 4 dan - 1, 3 persimpangan secara bergantian membentuk unit disakarida berulang. Agarosa rantai bercabang diekstraksi dari - 1, 3 ikatan memisahkan rantai lainnya. Bahan yang diekstrak dari rumput laut dengan air panas mengandung agar-agar sekitar 40%. Agar-agar yang tersedia secara komersial (umumnya dikenal sebagai agar-agar) sering kali berbentuk lembaran atau tali longgar dan biasanya digunakan sebagai permen karet, bahan pengemas obat, atau media kultur bakteri. Agarosa murni sering digunakan di laboratorium biokimia sebagai bahan pendukung semi padat dalam elektroforesis, kromatografi, dan teknologi lain untuk pemisahan dan analisis makromolekul biologis atau molekul kecil.
Proses produksi agarosa dapat dibagi menjadi empat bagian: perlakuan awal, ekstraksi, perlakuan selulosa DEAE dan dehidrasi
1) Bahan baku tepung yang telah diolah sebelumnya langsung dikeringkan pada suhu 80C selama 1/2 jam. bahan baku strip dan blok dicuci dengan air, dipotong kecil-kecil, dan dipanggang
2) Ekstraksi: setelah diaduk dan diekstraksi dengan larutan ester campuran natrium asetat asam asetat selama beberapa jam, buang airnya dengan cara dihisap, dicuci, kemudian diaduk dan diekstraksi dengan larutan buffer natrium karbonat natrium bikarbonat selama beberapa jam, lalu dipompa, disaring dan dicuci dengan air.
3) Gel agar-agar yang diekstraksi dengan larutan buffer dilarutkan ke dalam larutan 4% dengan cara dipanaskan dengan air, kemudian ditambahkan selulosa DEAE untuk diaduk selama 3-4 jam dengan pengawetan panas, kemudian disentrifugasi. Filtratnya dikumpulkan dan disaring untuk mendapatkan larutan putih dalam keadaan koloid
4) Dehidrasi: setelah filtrat putih dipanaskan, tambahkan etanol 95% dengan cepat sambil diaduk hingga tidak ada endapan yang terlihat jelas, dinginkan hingga suhu kamar, tuangkan larutan lapisan atas, cuci dan keringkan endapan hingga diperoleh produk, dengan rendemen 71%
Pemulihan reagen Pemulihan selulosa DEAE: setelah sentrifugasi, endapan direbus dengan air, disaring pada kain sutra 100 mesh, diulangi beberapa kali hingga filtratnya jernih, kemudian dicuci dengan 0,5mol/1 HCI, 0,5mol/1 NaOH dan air, dan dikeringkan. Tingkat pemulihan adalah 95% Fraksi 80 C dikumpulkan dengan distilasi langsung larutan berair etanol yang diperoleh dari larutan berair Yichun. Kemudian tambahkan natrium klorida padat hingga jenuh dan terus distilasi. 70% dapat diisi. Setelah natrium klorida dalam botol diuapkan, dapat juga diisi dengan katup.
Bubuk Agarosaadalah polisakarida yang diekstrak dari rumput laut dan merupakan komponen utama agar. Sejak penemuannya, ia telah banyak digunakan di berbagai bidang karena sifat fisik dan kimianya yang unik, seperti kemampuan pembentukan gel, stabilitas termal, stabilitas kimia, dan biokompatibilitas. Berikut penjelasan detail mengenai tujuannya:
Elektroforesis gel agarosa adalah salah satu teknik pemisahan dan analisis yang paling umum digunakan dalam biologi molekuler. Sebagai media elektroforesis gel, agarosa memiliki keunggulan ukuran pori yang besar, rentang pemisahan yang luas, dan pengoperasian yang sederhana. Dalam proses elektroforesis, makromolekul biologis seperti DNA, RNA atau protein bermigrasi melalui pori-pori gel agarosa di bawah pengaruh medan listrik. Karena perbedaan muatan, ukuran dan bentuk molekul yang berbeda, kecepatan migrasinya dalam gel juga berbeda, sehingga mencapai pemisahan. Elektroforesis gel agarosa banyak digunakan dalam kloning gen, analisis ekspresi gen, dan deteksi mutasi gen. Ini biasanya digunakan sebagai pendukung atau matriks dalam kultur sel. Karena biokompatibilitas dan stabilitas kimianya yang sangat baik, agarosa dapat menyediakan lingkungan pertumbuhan sel yang stabil. Misalnya, dalam percobaan pembentukan koloni agar-agar lunak, agarosa digunakan untuk menyiapkan media kultur semi-padat guna mendeteksi kemampuan pembentukan koloni sel, yang sangat penting untuk mengevaluasi tingkat transformasi sel menjadi ganas.
Selain itu, agarosa juga dapat dikombinasikan dengan biomaterial lain untuk menyiapkan bahan perancah komposit untuk digunakan dalam rekayasa jaringan dan pengobatan regeneratif. Gel agarosa juga berperan penting dalam imunodifusi dan imunoelektroforesis. Dalam teknologi tersebut, gel agarosa sebagai media reaksi antigen dan antibodi dapat membentuk garis atau cincin pengendapan yang jelas, yang dapat digunakan untuk mendeteksi dan menganalisis keberadaan dan konsentrasi antigen atau antibodi. Ukuran pori dan sifat muatan gel agarosa dapat mempengaruhi laju difusi dan efisiensi pengikatan antigen dan antibodi, sehingga kondisi percobaan dapat dioptimalkan dengan menyesuaikan konsentrasi dan jenis agarosa.
Penerapan dalam Eksperimen Biologi Molekuler
Elektroforesis gel agarosa tidak hanya dapat digunakan untuk memisahkan DNA dan RNA, tetapi juga dikombinasikan dengan teknologi lain untuk mencapai pemurniannya. Misalnya, dalam proses ekstraksi DNA, elektroforesis gel agarosa dapat digunakan untuk mendeteksi integritas dan kemurnian DNA, dan kemudian segmen DNA target dapat dipisahkan dari gel dengan pemotongan dan pemulihan gel. Metode ini mempunyai kelebihan yaitu pengoperasian yang mudah dan tingkat pemulihan yang tinggi. Dalam percobaan hibridisasi asam nukleat, gel agarosa dapat digunakan sebagai pendukung fase padat untuk memasang probe DNA atau RNA pada gel, dan kemudian hibridisasi dengan asam nukleat target berlabel. Dengan mendeteksi keberadaan dan intensitas sinyal hibridisasi, keberadaan dan konsentrasi asam nukleat target dapat ditentukan.
Ukuran pori dan sifat muatan gel agarosa dapat mempengaruhi efisiensi pengikatan probe dan asam nukleat target, sehingga kondisi hibridisasi dapat dioptimalkan dengan menyesuaikan konsentrasi dan jenis agarosa. Reaksi berantai polimerase (PCR) adalah salah satu teknik yang paling umum digunakan dalam biologi molekuler untuk memperkuat DNA. Dalam analisis produk PCR, elektroforesis gel agarosa merupakan salah satu metode yang paling umum digunakan. Dengan memisahkan produk PCR melalui elektroforesis, ukuran dan kemurnian fragmen yang diamplifikasi dapat dideteksi, sehingga menentukan apakah reaksi PCR berhasil dan apakah terdapat masalah amplifikasi yang tidak spesifik.
Meskipun ukuran pori gel agarosa relatif besar, namun tidak cocok untuk memisahkan protein bermolekul kecil, namun dalam beberapa kasus masih dapat digunakan untuk pemisahan dan pemurnian protein. Misalnya, dalam elektroforesis gel preparatif, gel agarosa dapat digunakan untuk memisahkan dan memurnikan protein dengan berat molekul lebih besar. Selain itu, agarosa juga dapat dikombinasikan dengan bahan lain untuk membuat gel komposit guna memperluas jangkauan pemisahan dan meningkatkan efisiensi pemisahan. Dalam beberapa percobaan penentuan aktivitas enzim, gel agarosa dapat digunakan sebagai pembawa imobilisasi enzim. Imobilisasi enzim pada gel agarosa dapat menjaga aktivitas dan stabilitas enzim serta memudahkan pemisahan dan perolehan kembali enzim dari reaktan. Metode ini mempunyai aplikasi yang luas dalam bidang rekayasa enzim.
Aplikasi dalam Mikrobiologi
Agarosa umumnya digunakan sebagai koagulan dalam media kultur mikroba. Dibandingkan dengan agar, agarosa memiliki kemurnian lebih tinggi dan kandungan pengotor lebih rendah sehingga lebih cocok untuk budidaya mikroba. Saat menyiapkan media kultur padat, larutkan agarosa dalam air panas, lalu tambahkan nutrisi lain dan antibiotik, lalu dinginkan hingga membentuk media kultur padat. Jenis media kultur ini dapat menyediakan lingkungan pertumbuhan yang stabil bagi mikroorganisme, memfasilitasi isolasi, pemurnian, dan identifikasi. Dalam percobaan identifikasi mikrobiologi, gel agarosa dapat digunakan untuk menyiapkan media identifikasi spesifik. Misalnya, ketika mengidentifikasi bakteri usus, media kultur agarosa yang mengandung gula tertentu dapat digunakan untuk membedakan berbagai jenis bakteri dengan mengamati fermentasi gulanya. Selain itu, gel agarosa juga dapat digunakan untuk menyiapkan media reaksi biokimia mikroorganisme untuk mendeteksi karakteristik metabolisme dan aktivitas enzimnya.
Bubuk Agarosaumumnya dipanaskan hingga di atas 90 derajat untuk larut dalam air, dan ketika suhu turun hingga 35-40 derajat, ia membentuk gel semi-padat yang baik, yang merupakan fitur utama dan dasar dari berbagai kegunaannya. Kinerja gel agarosa biasanya dinyatakan dengan kekuatan gel. Semakin tinggi kekuatannya, semakin baik kinerja gelnya. Gel agarosa disebabkan oleh adanya ikatan hidrogen. Faktor apa pun yang dapat merusak ikatan hidrogen dapat menyebabkan rusaknya gel. Agarosa bersifat hidrofilik dan hampir sepenuhnya bebas dari gugus bermuatan. Jarang menyebabkan denaturasi dan adsorpsi makromolekul biologis yang sensitif. Ini adalah pembawa inert yang ideal. Dalam proses pembuatan agarosa, agar pektin harus dihilangkan sebanyak mungkin, jika tidak, mungkin terdapat sejumlah kecil sulfat dan asam piruvat untuk menggantikan gugus pengion dalam agarosa, yang akan menyebabkan elektroosmosis (EEO) dan mempengaruhi pergerakan partikel. Kandungan sulfat agarosa dengan kualitas baik relatif rendah, biasanya di bawah 0,2%, dan elektroosmosisnya relatif kecil, biasanya di bawah 0,13. Inilah sebabnya mengapa agarosa lebih mahal dibandingkan agar.
Pada tahun 1937, Araki memisahkan agarosa dari agar untuk pertama kalinya, tetapi baru pada tahun 1961 hjertin pertama kali menemukan kinerja agarosa yang sangat baik sehingga menarik lebih banyak perhatian dan memulai produksi industri. Agarosa banyak digunakan dalam uji klinis, analisis biokimia dan pemisahan biomakromolekul.
Bubuk agarosa adalah alat mendasar dalam biologi molekuler dan bioteknologi, dengan berbagai aplikasi dalam elektroforesis gel, kromatografi afinitas, imunodifusi, dan imunoelektroforesis. Sifat uniknya, seperti kemudahan penggunaan, keserbagunaan, toksisitas rendah, dan efektivitas-biaya, menjadikannya komponen yang sangat diperlukan dalam penelitian laboratorium. Meskipun memiliki keterbatasan, seperti resolusi terbatas dan kerapuhan, kemajuan terkini dalam teknologi gel agarosa, termasuk gel-resolusi tinggi, gel pra-cetakan, dan perangkat mikrofluida berbasis agarosa, telah memperluas kegunaannya dan meningkatkan kinerjanya. Seiring dengan kemajuan penelitian ilmiah, bubuk agarosa tidak diragukan lagi akan tetap menjadi reagen yang berharga dan penting dalam perangkat biologi molekuler dan bioteknologi.
Tag populer: bubuk agarosa cas 9012-36-6, pemasok, produsen, pabrik, grosir, beli, harga, massal, untuk dijual