Janus Hijau B, nama Inggris Janus Green, rumus molekul C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, merupakan bubuk padat berwarna hijau pada suhu dan tekanan kamar. Tampaknya larut dalam air tetapi sedikit larut dalam pelarut organik alkohol. Ia memiliki kelarutan yang tinggi dalam air, terutama bila dilarutkan dalam air panas dan tampak berwarna biru. Ini juga sedikit larut dalam pelarut alkohol. Sifat ini memungkinkannya berdifusi dan mewarnai sampel biologis dengan cepat. Ini adalah zat pewarna hidup spesifik yang dapat digunakan untuk pewarnaan hidup mitokondria, pewarnaan jamur dan protozoa, pewarnaan bagian embrio, serta untuk indikator redoks dan aditif pelapisan tembaga. Ini memiliki aplikasi yang baik dalam bidang penelitian dasar seperti biokimia dan pewarna fluoresen. Struktur molekulnya mengandung pewarna azo, yang menjadikannya pewarna organik yang efektif. Muatan positif dalam struktur molekulnya juga membuatnya memiliki nilai penerapan tertentu dalam bahan pelapisan listrik.
|
|
|
|
Rumus Kimia |
C30H31ClN6+ |
|
Massa Tepat |
510 |
|
Berat Molekul |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Analisis Unsur |
C, 70,51; H, 6.11; N, 16.44; Kl, 6.94 |
Janus Hijau B, sebagai pewarna biologis yang penting, memiliki beragam aplikasi di berbagai bidang.
1. Pewarnaan mitokondria in vivo
Penggunaan yang paling-dikenal adalah sebagai zat pewarna hidup spesifik mitokondria. Mitokondria adalah "pabrik energi" dalam sel, yang bertanggung jawab memproduksi molekul energi seperti ATP untuk mempertahankan aktivitas kehidupan sel. Ia secara spesifik dapat menodai mitokondria, membuatnya tampak biru-hijau di bawah mikroskop-kekuatan tinggi, sedangkan sitoplasma hampir tidak berwarna. Karakteristik pewarnaan ini memungkinkan peneliti mengamati dengan jelas distribusi, morfologi, dan kuantitas mitokondria dalam sel, yang sangat penting untuk mempelajari fungsi, metabolisme, dan hubungannya dengan penyakit mitokondria.
2. Pewarnaan jamur dan protozoa
Selain pewarnaan mitokondria juga dapat digunakan untuk pewarnaan jamur dan protozoa. Jamur dan protozoa merupakan objek penting dalam penelitian biologi dan medis, dan morfologi, struktur, dan karakteristik fisiologisnya sangat penting untuk memahami proses kehidupan dan mekanisme penyakit. Sifat pewarnaannya membuat organisme kecil ini lebih mudah diamati dan diidentifikasi di bawah mikroskop, sehingga memberikan dukungan kuat untuk penelitian terkait.
3. Pewarnaan bagian embrio
Dalam penelitian biologi perkembangan dan embriologi, pewarnaan bagian embrio merupakan sarana penting untuk memahami proses perkembangan embrio dan perubahan struktural. Ini dapat digunakan untuk pewarnaan irisan embrio guna membantu peneliti mengamati dan menganalisis struktur jaringan seluler dan karakteristik morfologi embrio pada berbagai tahap perkembangan. Hal ini sangat penting untuk memahami mekanisme pengaturan perkembangan embrio, terjadinya penyakit genetik, dan masalah kesehatan reproduksi.
4. Indikator redoks
Ia juga memiliki fungsi sebagai indikator reduksi-oksidasi. Dalam reaksi kimia, bilangan oksidasi dan reduksi suatu zat sering kali disertai dengan perubahan warna. Dalam keadaan redoks yang berbeda, ia akan menunjukkan warna yang berbeda dan oleh karena itu dapat digunakan sebagai indikator reaksi redoks. Karakteristik ini menjadikannya memiliki nilai penerapan potensial di berbagai bidang seperti analisis kimia, pemantauan lingkungan, dan industri makanan.
Mulai dari 4-amino-N, N-diethylaniline atau p-phenylenediamine (mengandung N, N-diethylaniline), metilen violet 3RAX diperoleh melalui siklisasi dengan anilin dengan adanya oksidan. Kemudian,Janus Hijau Bdibuat dengan diazotisasi dan reaksi kopling.
Bahan awal: Dengan asumsi kita menggunakan 4-amino-N, N-diethylaniline sebagai bahan awal utama. Kasus p-phenylenediamine (mengandung N, N-diethylaniline) mungkin memerlukan langkah tambahan untuk memisahkan atau mensintesis N, N-p-phenylenediamine tersubstitusi dietil yang diinginkan, namun di sini kita fokus pada kasus bahan awal tunggal.
Tujuan: Untuk mensiklisasi 4-amino-N, N-dietilanilin dengan anilin atau senyawa lain yang sesuai untuk membentuk struktur benzoheterosiklik yang mirip dengan metilen violet 3RAX. Pertama, 4-amino-N, N-diethylaniline diubah menjadi zat antara yang lebih mudah disikluskan melalui beberapa cara seperti asilasi, kondensasi, dll., dan kemudian zat antara tersebut disikluskan dengan anilin.
Contoh reaksi (tidak langsung, hanya sebagai ilustrasi):
Reaksi asilasi (pembentukan zat antara tengah): 4-amino-N, N-dietilanilin bereaksi dengan asil klorida atau anhidrida menghasilkan urea yang sesuai.
4-amino-N, N-dietilanilin+asil klorida → perantara tengah+HCl
Reaksi cincin (hipotesis): Zat antara tengah disikluskan dengan anilin dalam kondisi katalis dan/atau pemanasan.
Amida perantara+anilin → zat antara mirip dengan metilen violet 3RAX
Tujuan: Untuk memastikan bahwa zat antara mengandung amina primer aromatik untuk reaksi diazotisasi selanjutnya.
Contoh reaksi (jika zat antara sudah berupa amina primer aromatik, lewati langkah ini):
Jika zat antara tersebut bukan merupakan amina primer aromatik, maka zat antara tersebut perlu diubah menjadi amina primer aromatik melalui reduksi, hidrolisis, atau reaksi lainnya.
Zat antara amina non primer+zat pereduksi/zat penghidrolisis → zat antara amina primer aromatik
Tujuan: Untuk mengubah zat antara amina primer aromatik menjadi garam diazonium.
Persamaan kimia:
Bahan antara amina primer aromatik+asam nitrat+asam → garam diazonium+air
Catatan: Reaksi diazotisasi biasanya dilakukan pada suhu rendah (seperti di bawah 0 derajat C) dan dalam kondisi asam untuk mencegah penguraian garam diazonium.
Tujuan: Untuk menggabungkan garam diazonium dengan senyawa fenolik atau amina aromatik yang sesuai untuk membentuk Jianna Green B.
Persamaan kimia (contoh): garam diazonium+senyawa fenolik atau amina aromatik → C30H31ClN6+oleh-produk
Catatan: Reaksi penggandengan biasanya dilakukan dalam kondisi basa untuk mendorong pembentukan produk penggandengan. Pemilihan senyawa fenolik atau amina aromatik yang tepat sangat penting untuk mendapatkan produk sasaran, Jianna Green B.
Langkah tambahan: Pemurnian dan-pemrosesan pasca
Tujuan: Untuk mengisolasi dan memurnikan Jianna Green B dari campuran reaksi.
Metode: Ini mungkin mencakup teknik seperti ekstraksi pelarut, kristalisasi, rekristalisasi, pemisahan kromatografi (seperti kromatografi kolom, kromatografi lapis tipis, HPLC, dll.).
Perhatian: Langkah-langkah pemurnian dan pasca{0}}pemrosesan sangat penting untuk mendapatkan produk target dengan-kemurnian tinggi. Di laboratorium, langkah-langkah ini mungkin perlu diulang beberapa kali untuk mengoptimalkan hasil dan kemurnian.
Dalam percobaan biologi,Janus Hijau Bbanyak digunakan sebagai zat pewarnaan hidup yang umum digunakan untuk mengamati morfologi dan distribusi mitokondria. Karakteristik pewarnaannya yang unik memungkinkan mitokondria dapat dibedakan dengan jelas di bawah mikroskop, menjadikannya alat penting dalam penelitian biologi sel. Berikut ini akan diuraikan cara pembuatan larutan pewarna Jianna Green B fraksi kualitas 1%. Proses ini tidak hanya melibatkan penimbangan dan pelarutan reagen kimia secara tepat, namun juga mempertimbangkan faktor-faktor seperti suhu dan pemilihan pelarut secara cermat untuk memastikan bahwa larutan pewarna akhir stabil dan efektif.
|
|
|
|
|
Persiapan eksperimental
Bahan dan reagen
Bubuk Jianna Green B:Pastikan Jianna Green B yang dibeli memiliki kemurnian tinggi dan bebas dari kotoran, yang merupakan dasar untuk menyiapkan larutan pewarna berkualitas tinggi.
Larutan garam fisiologis: Larutan garam fisiologis, juga dikenal sebagai larutan natrium klorida 0,9%, sering digunakan sebagai pelarut dalam eksperimen biologis untuk mengurangi kerusakan sel karena tekanan osmotiknya mirip dengan sel manusia. Pada percobaan ini, garam fisiologis digunakan sebagai media disolusi Jianna Green B.
Silinder pengukur: Digunakan untuk mengukur larutan garam fisiologis secara akurat.
Gelas Beaker: Digunakan untuk melarutkan bubuk Jianna Green B.
Pengaduk magnetik (opsional): Digunakan untuk mempercepat proses pembubaran dan memastikan bubuk terdispersi secara merata dalam pelarut.
Pengukur suhu: Digunakan untuk memantau dan mengontrol suhu selama proses pelarutan.
Timbangan elektronik: Digunakan untuk menimbang bubuk Jianna Green B dengan tepat.
Labu ukur (opsional): Jika diinginkan presisi yang lebih tinggi, labu ukur dapat digunakan untuk penentuan volume. Namun pada cara pembuatan yang sederhana ini dapat digunakan langsung gelas kimia dan gelas ukur.
Botol kaca coklat: Digunakan untuk menyimpan larutan pewarna Jianna Green B yang telah disiapkan. Botol berwarna coklat dapat mencegah pengaruh cahaya pada larutan pewarna dan menjaga kestabilannya.
Perlindungan keamanan
Kenakan jas lab: Lindungi pakaian dari kontaminasi bahan kimia.
Kenakan sarung tangan: Cegah kontak kulit langsung dengan bahan kimia.
Kenakan kacamata: Untuk mencegah larutan terciprat ke mata.
Pengoperasian di lemari asam:Memastikan sirkulasi udara di laboratorium dan mengurangi akumulasi gas berbahaya.
Langkah-langkah persiapan
Timbang 0,5 g bubuk Jianna Green B secara akurat menggunakan timbangan elektronik. Perhatikan bahwa timbangan perlu dikalibrasi sebelum menimbang untuk memastikan penimbangan akurat.
Tuangkan bubuk Jianna Green B yang telah ditimbang dengan hati-hati ke dalam gelas kimia bersih untuk mencegah bubuk beterbangan.
Ukur 50mL garam fisiologis secara akurat menggunakan gelas ukur. Perhatikan bahwa saat mengukur, silinder pengukur harus ditempatkan pada permukaan yang stabil, dengan garis pandang sejajar dengan titik terendah dari ketinggian cairan untuk memastikan pengukuran yang akurat.
Tuangkan garam fisiologis terukur secara perlahan ke dalam gelas kimia yang berisi bubuk Jianna Green B. Perhatikan bahwa cairan tersebut harus dituangkan secara perlahan di sepanjang dinding gelas kimia untuk menghindari percikan cairan atau menghasilkan banyak busa.
Aduk perlahan larutan menggunakan batang kaca untuk membantu melarutkan bubuk Jianna Green B. Jika kondisinya memungkinkan, pengaduk magnetik dapat digunakan untuk pengadukan guna meningkatkan efisiensi disolusi.
Selama proses pengadukan, perhatikan perubahan warna larutan. Saat Jianna Green B larut, larutan akan berangsur-angsur berubah menjadi hijau tua atau biru-hijau.
Karena terbatasnya kelarutan Jianna Green B pada suhu kamar, untuk meningkatkan efisiensi disolusi, gelas kimia dapat dipanaskan dalam penangas air hingga suhu 30-40 derajat Celcius. Perhatikan bahwa suhu tidak boleh terlalu tinggi selama pemanasan untuk menghindari kerusakan struktur kimia Jianna Green B atau menyebabkan penguapan pelarut yang berlebihan.
Selama proses pemanasan, terus aduk larutan hingga bubuk Jianna Green B benar-benar larut dan larutan menjadi seragam dan transparan.
Setelah larut, periksa warna dan transparansi larutan. Jika terdapat partikel yang tidak larut atau warna yang tidak merata dalam larutan, pengadukan atau pemanasan yang tepat harus dilanjutkan sampai masalah teratasi.
Jika konsentrasi larutan perlu disesuaikan, jumlah garam fisiologis atau bubuk Jianna Green B dapat ditambah atau dikurangi sesuai dengan situasi sebenarnya. Namun dalam metode persiapan ini, kami telah menimbang reagen secara akurat berdasarkan fraksi massa 1%, sehingga biasanya tidak diperlukan penyesuaian tambahan.
Tuangkan larutan pewarna Jianna Green B yang telah disiapkan ke dalam botol kaca berwarna coklat dan tutup rapat untuk mencegah kontaminasi dan penguapan.
Labeli botol dengan nama, konsentrasi, tanggal pembuatan, dan nama pengguna larutan pewarna untuk penggunaan dan pengelolaan di masa mendatang.
Tindakan pencegahan
Penimbangan yang akurat:
Memastikan pengukuran yang akurat terhadap bubuk B hijau dan garam fisiologis yang sehat adalah kunci dalam menyiapkan-larutan pewarna berkualitas tinggi.
01
Kontrol suhu:
Selama proses pemanasan, suhu harus dikontrol dengan ketat untuk menghindari dampak buruk pada kualitas larutan pewarna yang disebabkan oleh suhu yang terlalu tinggi atau rendah.
02
Pengadukan secukupnya:
Pengadukan adalah langkah kunci untuk memastikan bahwa bubuk B hijau larut secara merata dalam garam fisiologis, dan harus dilanjutkan hingga larutan menjadi seragam dan transparan.
03
Pengoperasian yang aman:
Ikuti dengan ketat peraturan keselamatan laboratorium selama seluruh proses persiapan untuk memastikan keselamatan pribadi dan keselamatan lingkungan eksperimental.
04
Penggunaan tepat waktu:
Penyimpanan larutan pewarna yang disiapkan dalam jangka panjang masih dapat menyebabkan penurunan efek pewarnaan atau perubahan kimia lainnya. Disarankan untuk menggunakannya sesegera mungkin setelah persiapan untuk memastikan efek pewarnaan terbaik.
05
Pertanyaan Umum
1. Apa itu Janus Hijau B?
Janus Green B adalah pewarna berbasis phenazine dasar yang disintesis secara artifisial, yang biasanya digunakan dalam pewarnaan biologis (seperti pewarnaan hidup mitokondria) dan sebagai indikator reduksi oksidasi.
2. Apa tujuan utamanya?
Terutama digunakan dalam percobaan biologis:
- Pewarnaan mitokondria secara langsung (karena sistem membran dalam mitokondria dapat mengembalikannya ke keadaan tidak berwarna, sehingga menunjukkan aktivitas redoksnya).
- Deteksi respirasi sel (sebagai indikator reduksi-oksidasi, warna biru menunjukkan keadaan teroksidasi, dan tidak berwarna menunjukkan keadaan tereduksi).
- Dapat juga digunakan sebagai pewarna sutra dan kulit di industri.
3. Apa prinsip pewarnaan?
Di mitokondria, Janus Green B direduksi menjadi produk tidak berwarna oleh enzim pada membran bagian dalam (seperti sitokrom c oksidase) di dalam mitokondria; setelah meninggalkan mitokondria, ia-dioksidasi kembali oleh oksigen menjadi warna biru. Reaksi redoks reversibel ini memungkinkannya secara spesifik menunjukkan aktivitas mitokondria.
4. Apa yang harus diperhatikan saat menggunakan?
- Konsentrasi pewarna dan waktu perlu dikontrol (biasanya 0,01%-0,02%), untuk menghindari pewarnaan berlebihan yang dapat mengganggu aktivitas sel.
- Untuk beberapa tipe sel, efek pewarnaan mungkin tidak memuaskan. Kondisinya perlu dioptimalkan.
- Simpan dalam wadah gelap dan tertutup untuk mencegah penguraian.
Tag populer: janus green b cas 2869-83-2, pemasok, produsen, pabrik, grosir, beli, harga, massal, untuk dijual