Bremelanotida(tautan:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptida/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) merupakan hormon polipeptida sintetik yang strukturnya mirip dengan leptin, tirosin, dan melanin kulit yang secara alami ada dalam tubuh manusia. Sebagai obat jenis baru, Bremelanotide memiliki fungsi pengaturan dan sering digunakan dalam pengobatan disfungsi ereksi dan libido rendah. Skenario penggunaan dalam kehidupan sehari-hari menjadi semakin luas. Dengan penelitian mendalam yang dilakukan orang-orang terhadapnya, orang-orang telah menemukan berbagai macam metode sintesisnya, yang akan dianalisis satu per satu di bawah ini.
1. Disintesis dari L-tirosin:
Dalam metode sintesis asli, struktur Bremelanotida diperoleh dengan mendeformasi L-tirosin. Pertama, L-tirosin diubah menjadi dipeptidil-L-tirosin (Boc-Tyr(OCO)2-OH) dengan adanya asam fluorida, di mana Boc mewakili gugus suksinimidometil (t -butoksikarbonil). Selanjutnya, tambahkan benzil alkohol (PhCH2OH), 1-(3-diethylaminopropoxy)-2-(2-methazolyl)ethane (EDC), dan N-hydroxybutanediol dalam Reagen tetrahydrofuran (THF) seperti imida (HOBt) dapat menggabungkan dipeptidil-L-tirosin dengan pseudopeptida alanin (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu- NH2) disintesis menjadi Bremelanotide.
(1) Konversi L-tirosin menjadi dipeptidil-L-tirosin:
Pertama, larutkan L-tirosin dalam air dan tambahkan asam fluorida dalam jumlah yang sesuai. Biasanya, konsentrasi L-tirosin adalah 1M dan jumlah asam fluorida adalah 5-10%. Campuran didiamkan pada suhu 0-4 derajat selama 1 jam dan kemudian didinginkan.
Selanjutnya, kompleks asam L-tirosin-hidrofluorat yang diperoleh ditambahkan tetes demi tetes ke tetrahidrofuran. Pada saat yang sama, sejumlah reagen reaksi seperti benzil alkohol, EDC dan HOBt ditambahkan ke tetrahidrofuran. Setelah didiamkan selama 2 jam sambil diaduk, dapat diperoleh dipeptidil-L-tirosin (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Reaksi dipeptidil-L-tirosin dengan pseudopeptida alanin:
Larutkan dipeptidil-L-tirosin yang diperoleh dalam N,N-dimetilformamida (DMF) dan tambahkan pseudopeptida alanin. Kondisi reaksi meliputi suhu, waktu reaksi, konsentrasi reaktan, dll. Faktor-faktor ini akan mempengaruhi hasil dan kemurnian produk. Pada konsentrasi 225 g/L, rasio Boc-Tyr(OCO)2-OH terhadap pseudopeptida alanin adalah 1:30.
Setelah diaduk dan didiamkan dalam -N,N-dimetilformamida selama 24 jam, larutan reaksi dituangkan ke dalam air es dan diendapkan dengan larutan asam aldehida. Hasilnya adalah produk akhir Bremelanotide.
Metode sintesis terutama memiliki keuntungan sebagai berikut: kemurnian produk yang tinggi dan proses produksi yang sederhana. Namun cara ini juga mempunyai beberapa kelemahan, seperti memakan waktu lama, biaya tinggi dan lain sebagainya.
2. Sintesis fase padat:
Sintesis fase padat saat ini merupakan salah satu metode sintetik Bremelanotida yang paling umum digunakan, dan juga merupakan metode sintetik utama di bidang sintesis peptida. Dalam metode fase padat, rantai polipeptida dibangun dengan penambahan unit asam amino secara berurutan. Pertama, unit asam amino pertama dimodifikasi menjadi gugus pelindung N yang bersifat restriktif dan tidak dapat terdegradasi secara sterik (seperti Fmoc), yang kemudian dilekatkan pada media berpori. Selanjutnya, dengan memasukkan gugus pelindung asam akrilat, reaksi asilasi dan langkah lainnya, setiap unit asam amino ditambahkan pada media berpori, dan rantai polipeptida lengkap secara bertahap dibangun. Terakhir, dalam langkah menghilangkan gugus pelindung N, denitrifikasi, dll., rantai polipeptida Bremelanotida dengan urutan tertentu dapat dibuat.
Metode sintesis fase padat terutama memiliki keuntungan sebagai berikut: efisiensi tinggi dan tingkat pemanfaatan bahan baku yang tinggi. Namun cara sintetik ini juga memiliki beberapa kelemahan, seperti diperlukan beberapa tahap pengeringan dan pencucian dalam proses produksinya, dan langkah-langkah tersebut akan mengakibatkan penurunan kualitas produk.
3. Sintesis fase cair:
Sintesis fase cair adalah metode sintesis Bremelanotida lainnya, yang dilakukan melalui sistem reaksi cair. Langkah-langkah utama metode sintesis meliputi penyaringan bahan baku, desain molekul obat, pemilihan rute sintesis, reaksi, pemurnian dan sejenisnya. Dibandingkan dengan sintesis fase padat, metode sintesis fase cair dapat memperoleh Bremelanotida dengan kemurnian dan aktivitas biologis yang lebih tinggi. Dalam metode sintesis fasa cair, reagen reaksi yang umum digunakan adalah dihidroksietil merkaptan (EDT), zat etoksikarbonilasi (EEDQ), tioasetil klorida, dll.
Metode sintesis fase cair terutama memiliki keuntungan sebagai berikut: pengoperasian sederhana dan kemurnian produk yang tinggi. Namun metode sintesis ini juga memiliki beberapa kelemahan, seperti waktu sintesis yang lebih lama dan biaya yang lebih tinggi.
4. Sintesis fisikokimia:
Dalam metode sintesis fisikokimia, Bremelanotida disintesis dengan metode fisik dan kimia. Metode ini pada dasarnya memiliki dua pendekatan berbeda: pertama adalah merealisasikan sintesis Bremelanotida melalui operasi berulang transformasi fase padat-cair; yang lainnya adalah mendorong perakitan mandiri dan polimerisasi rantai polipeptida melalui kompresi fisik dan mekanis, sehingga mensintesis Bremelanotida.
Mekanisme reaksi:
Sintesis Bremelanotida terutama dilakukan dengan mengubah L-tirosin menjadi L-fenolik asilat, kemudian mensintesis L-fenolik asilat dan pseudopeptida, dan akhirnya memperoleh produk. Mekanisme reaksinya adalah sebagai berikut:
(1) Konversi L-tirosin menjadi L-fenol asilasi:
L-tirosin bereaksi dengan natrium azida dalam larutan THF menghasilkan L-fenol asilasi. Natrium azida akan mengubah gugus hidroksil dalam tirosin menjadi gugus azida, dan kemudian perlakuan asam akan mengubah gugus azida menjadi asilat fenolik.
(2) L-fenol asilasi diubah menjadi asam klorida:
L-fenolik asilasi bereaksi dengan asetil klorida dalam THF menghasilkan asam klorida. Lima kali lipat jumlah TBHS untuk menyerap HCl yang dihasilkan. Klorida asam adalah zat antara reaksi yang diperlukan untuk reaksi selanjutnya.
(3) Sintesis asam klorida dan pseudopeptida:
Asam klorida antara bereaksi dengan pseudopeptida di DMF untuk menghasilkan rantai polipeptida Bremelanotida. Yang terjadi pada langkah ini adalah reaksi kondensasi anhidrida, dengan HOBt sebagai katalisnya.
(4) Pemurnian dan analisis produk:
Produk akhir juga perlu dimurnikan dan dianalisis untuk memastikan kemurnian dan kualitas senyawa.
Metode sintesis fisikokimia terutama memiliki keuntungan sebagai berikut: pengoperasian sederhana dan periode persiapan singkat. Namun metode sintetik ini juga memiliki beberapa kelemahan, seperti kemurnian produk yang rendah dan keragaman produk yang tidak mencukupi.
Kesimpulannya, metode sintesis Bremelanotida beragam dan fleksibel, dan pemilihannya bergantung pada banyak faktor, seperti kondisi reaksi, biaya sintesis dan waktu reaksi, dll. Terlepas dari metode yang digunakan, kondisi reaksi yang stabil dan produk dengan kemurnian tinggi adalah kuncinya. kunci keberhasilan sintesis Bremelanotide.