IPTG, atau isopropil β-D-1-thiogalactopyranoside, adalah reagen terkenal di bidang biologi molekuler. Sebagaireagen IPTGpemasok, saya telah melihat secara langsung bagaimana bahan kimia kecil ini dapat berdampak besar pada penelitian protein, terutama dalam hal modifikasi protein pasca translasi.
Reagen IPTG
Kode Produk : BM-2-5-091
Nama Inggris: IPTG
CAS NO.: 367-93-1
DANA: C9H18O5S
UM: 238.3
EINECS: 206-703-0
Produsen: Pabrik Wuxi BLOOM TECH
Analisis: HPLC, LC-MS, HNMR
Pasar utama: AS, Australia, Brasil, Jepang, Jerman, Indonesia, Inggris, Selandia Baru, Kanada, dll.
Dukungan teknologi: Departemen Litbang-4
Kami menyediakanreagen IPTG, silakan merujuk ke situs web berikut untuk spesifikasi detail dan informasi produk.
Produk:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html
Apa itu Modifikasi Pasca Translasi?
Sebelum kita mendalami bagaimana IPTG mempengaruhi modifikasi pasca - translasi, mari kita bahas dengan cepat apa itu modifikasi pasca - translasi. Setelah protein disintesis dari mRNA dalam proses yang disebut translasi, sering kali protein tersebut mengalami berbagai modifikasi kimia. Modifikasi ini dapat mengubah struktur, fungsi, stabilitas, dan kemampuannya berinteraksi dengan molekul lain. Beberapa modifikasi pasca translasi yang umum termasuk fosforilasi, glikosilasi, asetilasi, dan ubiquitinasi.
Bagaimana IPTG Bekerja dalam Ekspresi Protein
IPTG banyak digunakan sebagai penginduksi ekspresi protein rekombinan pada bakteri, khususnya pada E. coli. Pada E. coli, lac operon adalah sekumpulan gen yang terlibat dalam metabolisme laktosa. Biasanya, operon lac ditekan, tetapi ketika IPTG ditambahkan ke dalam kultur, ia berikatan dengan protein penekan lac, menyebabkan perubahan konformasi. Perubahan ini melepaskan represor dari wilayah operator lac operon, memungkinkan RNA polimerase mengikat dan mentranskripsikan gen di bagian hilir, termasuk gen yang mengkode protein rekombinan yang kami minati.
Dampak pada Modifikasi Pasca-Translasi
Fosforilasi
Fosforilasi adalah salah satu modifikasi pasca translasi yang paling penting. Ini dapat mengatur aktivitas protein, lokalisasi, dan interaksi. Ketika IPTG digunakan untuk menginduksi ekspresi protein, secara tidak langsung dapat mempengaruhi fosforilasi. Misalnya, ekspresi berlebih dari protein yang diinduksi oleh IPTG mungkin menyebabkan ketidakseimbangan dalam sistem kinase - fosfatase sel. Beberapa kinase mungkin kewalahan dengan sejumlah besar substrat (protein yang baru disintesis), menyebabkan fosforilasi kurang atau berlebihan.
Selain itu, peningkatan aktivitas metabolisme dalam sel akibat ekspresi berlebih protein dapat mengubah ketersediaan ATP yang merupakan donor fosfat untuk reaksi fosforilasi. Hal ini selanjutnya dapat mengganggu pola fosforilasi normal dari protein yang diekspresikan.
Glikosilasi
Glikosilasi adalah penambahan gugus karbohidrat pada protein. Bakteri seperti E. coli, yang biasa digunakan untuk ekspresi protein dengan IPTG, tidak memiliki mesin glikosilasi yang sama seperti sel eukariotik.
Namun, kehadiran ekspresi protein yang diinduksi IPTG masih dapat memberikan dampak. Meningkatnya permintaan sumber daya seluler selama ekspresi berlebih protein dapat menyebabkan kekurangan gula nukleotida, yang merupakan bahan penyusun glikosilasi. Hal ini dapat mengakibatkan pola glikosilasi yang tidak lengkap atau abnormal jika protein mempunyai lokasi glikosilasi yang potensial.
Asetilasi
Asetilasi adalah modifikasi pasca translasi penting lainnya yang dapat mempengaruhi stabilitas dan fungsi protein. Ekspresi protein yang diinduksi IPTG dapat mengubah lingkungan intraseluler. Misalnya, peningkatan produksi protein dapat mengubah kadar asetil - KoA, yang merupakan donor asetil untuk reaksi asetilasi. Jika kadar asetil - KoA habis karena ekspresi protein tingkat tinggi, hal ini dapat menyebabkan berkurangnya asetilasi protein yang diekspresikan.
Studi Kasus
Mari kita lihat beberapa contoh dunia nyata. Dalam sebuah penelitian, peneliti mencoba mengekspresikan protein rekombinan manusia pada E. coli menggunakan IPTG. Mereka memperhatikan bahwa protein tersebut memiliki pola fosforilasi yang berbeda dibandingkan dengan protein asli dalam sel manusia. Ekspresi berlebih yang disebabkan oleh IPTG menyebabkan keadaan fosforilasi abnormal, yang mempengaruhi aktivitas protein.
Contoh lain terkait dengan glikosilasi. Ketika glikoprotein diekspresikan dalam E. coli dengan IPTG, kurangnya mesin glikosilasi yang tepat pada E. coli dikombinasikan dengan keterbatasan sumber daya yang disebabkan oleh ekspresi berlebih yang diinduksi IPTG menghasilkan protein yang tidak berfungsi. Pola glikosilasi yang abnormal mencegah protein melipat dengan benar dan berinteraksi dengan molekul targetnya.
Peran IPTG dalam Penelitian dan Industri
IPTG merupakan alat utama dalam penelitian dan industri bioteknologi. Dalam penelitian, hal ini memungkinkan para ilmuwan untuk mempelajari fungsi protein dengan mengekspresikannya secara berlebihan secara terkendali. Dalam industri bioteknologi, digunakan untuk produksi protein rekombinan skala besar untuk tujuan terapeutik dan diagnostik.
Namun dampak IPTG terhadap modifikasi pasca translasi perlu dipertimbangkan secara cermat. Misalnya, jika suatu protein dimaksudkan untuk penggunaan terapeutik, modifikasi abnormal pasca translasi apa pun dapat memengaruhi keamanan dan kemanjurannya. Oleh karena itu, para peneliti dan profesional industri perlu mengoptimalkan kondisi induksi IPTG untuk meminimalkan dampak tersebut.
Reagen Terkait Lainnya
Sebagai pemasok reagen IPTG, saya juga ingin menyebutkan beberapa reagen lain yang berkaitan dengan penelitian protein. Anda mungkin tertarikBubuk Hidroklorida Amitriptyline CAS 549 - 18 - 8, yang digunakan dalam beberapa penelitian yang berkaitan dengan interaksi protein - molekul kecil.Cilengitidaadalah reagen menarik lainnya yang dapat digunakan dalam studi interaksi protein - sel. DanProtoporfirin IX CAS 553 - 12 - 8memiliki aplikasi dalam interaksi protein - heme.
Kesimpulan dan Ajakan Bertindak
Kesimpulannya, IPTG adalah reagen kuat yang memiliki dampak signifikan terhadap modifikasi protein pasca translasi. Meskipun ini adalah alat yang berharga untuk ekspresi protein, kita perlu mewaspadai potensi dampaknya terhadap modifikasi pasca translasi. Baik Anda seorang peneliti di laboratorium atau profesional di industri bioteknologi, memahami dampak ini sangat penting untuk keberhasilan penelitian dan produksi protein.
Jika Anda tertarik untuk membeli reagen IPTG berkualitas tinggi atau reagen terkait lainnya yang saya sebutkan, jangan ragu untuk menghubungi kami. Kami di sini untuk memberi Anda produk dan dukungan terbaik untuk kebutuhan penelitian protein Anda.
Referensi
Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. (2002). Biologi Molekuler Sel. Ilmu Karangan Bunga.
Sambrook, J., & Russell, DW (2001). Kloning Molekuler: Manual Laboratorium. Pers Laboratorium Cold Spring Harbor.